Activitat enzimàtica de la CATALASA en diferents teixits animals i vegetals

En aquest experiment valorarem de forma quantitativa l'activitat enzimàtica de la Catalasa del fetge de pollastre. Dividirem la pràctica en dues parts. En la primera observarem la diferència d'activitat de la catalasa en diferents teixits animals i vegetals. Per aquesta part utilitzarem la pastanaga, la patata, el tomàquet i el fetge i el cor de pollastre. En la segona part veurem la influència de determinats factors en l'activitat enzimàtica...

La catalasa és un enzim present en els peroxisomes de les cèl·lules animals i vegetals que s'encarrega d'eliminar l'aigua oxigenada que es forma en algunes reaccions del metabolisme. La reacció química és la següent.
H2O2 --> 1/2 H2O + O2

Material:
Teixits animals; fetge i cor de pollastre
Teixits vegetals: patata, pastanaga, tomàquet
Tub d'assaig de coll ampla
Vas precipitats
Termòmetre
Gradeta
Aigua destil·lada
Aigua oxigenada al 3%
Pinces
Bisturí
Tisores

Protocol:
Experiment 1: Quin teixit presenta més activitat de la catalasa?
1- Tallarem tres trossos de patata, tomàquet, i pastanaga que pesin més o menys el mateix (mateixa mida 1cm3)
2- També tallarem dos trossos, un de fetge i un de cor de la mateixa mida i pes (1,2 g la patata, 0,9 g tomàquet, 1,1 g pastanaga, 0,9 g fetge i 1,2 g cor.) .
3- Ho posarem en cinc tubs amb cada teixit en un tub + 5 ml d'aigua destil·lada en cada.
4- Després posarem 2 ml d'aigua oxigenada i marcarem l'alçada que assoleixen les bombolles en cada tub. Mesurarem aquesta alçada en mm.

(imatge agafada de http://pbsciencelab.blogspot.com.es/)


Preguntes:
Variable dependent i independent?
Alçada de bombolles és la variable dependent i els diferents teixits la independent.
Problema que es vol investigar?
Quin teixit presenta més activitat de la catalasa?
Explicació dels resultats:
Hem pogut veure que el cor és el teixit que més activitat enzimàtica. Els teixits animals, comparat amb els teixits vegetals presenta més activitat.

Experiment 2: Com afecten diferents factors en l'activitat de la catalasa?
Agafarem el teixit del fetge i el posarem en 5 tubs d'assaig sota condicions diferents
1er tub: tros de teixit a temperatura ambient (a 19 graus 1 g)
2n tub: tros de fetge amb 10 ml d'HCl al 10% (0,9 g)
3er tub: fetge congelat (a 2 graus 1,2 g)
4t tub: fetge bullit. (1g)
5è tub: fetge submergit en una dissolucio saturada de NaCl (0,8 g)

Afegirem 2 ml d'aigua oxigenada i anotarem l'alçada de les bombolles (controlarem el temps que seran 10 minuts, el pes i la quantitat de dissolució.

PREGUNTES
Variable dependent i independent?
La variable dependent és l'alçada de les  bombolles i la independent les diferents condicions a les que hem sotmés el fetge.

Problema que es vol investigar?
Com afecten diferents condicions d'un teixit animal (fetge) en l'activitat de la catalasa sobre aquest?
Explicació dels resultats:
Hem pogut observar que el tub amb més activitat de la catalasa ha sigut el de NaCl, seguidament el congelat (perquè s'estava descongelant) i després el de temperatura ambient. Els dos que han presentat menys activitat han sigut amb àcid clorhídric i el bullit perquè estaven fora del pH òptim i de la Tª òptima. 

Quina és la funció de la catalasa en els teixits animals i vegetals? On es troba aquest enzim?
És un enzim que es troba als peroxisomas de les cèl·lules eucariotes. La funció de la catalasa és descomposar l'aigua oxigenada en aigua i oxigen ja que en el metabolisme es produeix aquesta aigua oxigenada que és una molècula tòxica.

Per què quan ens fem una ferida ens posem aigua oxigenada?
L'existència de catalasa en els teixits animals, s'aprofita per utilitzar l'aigua oxigenada com a desinfectant quan es tira sobre una ferida. Com molts dels bacteris patògens són anaerobis (no poden viure amb oxigen), moren amb el despreniment d'oxigen que es produeix quan la catalasa dels teixits actua sobre l'aigua oxigenada.